1、检查恒温恒湿培养箱标识牌是否处于停用或运行状态，检查培养箱的使用记录，若正常，则给培养箱挂上运行标识，即可进行操作。
2、给培养箱主箱体后背的水箱盛满水。
3、接通培养箱控制面板上的电源开关，开关上的指示灯亮，此时培养箱温度控制仪表与湿度控制仪表均有显示：
温度控制仪表“笔痴"行(红色)显示的是干球温度测量值，即培养箱内的实际温度，“厂痴"行(绿色)显示的是试验温度设定值;
湿度控制仪表“笔痴"行(红色)显示的是湿球温度测量值，即培养箱内的实际温度，“厂痴"行(绿色)显示的是湿球温度设定值。
4、温度、湿度的设定：
①先按一下温度控制仪表上的功能键，此时，“厂痴"行的温度值会闪烁，再通过按温度控制仪表的“△"、“▽"键修改温度设定值，使“厂痴"行的温度值达到试验所需的温度值，再按“厂贰罢"确认。
②当温度设定好后，根据试验所需在某一干球温度的相对湿度，查“相对湿度查算表"中数据所对应的差值，再将干球温度减去这一差值，即得到湿度控制仪表的设定值，将按一下湿度仪表上的功能键，此时，“厂痴"行的温度值会闪烁，再通过按温度控制仪表的“△"、“▽"键修改温度设定值，使“厂痴"行的温度值达到试验所需的温度值，再按“厂贰罢"确认。
5、打开培养箱的加热开关，开启加热，箱内鼓风电机运转，温度控制仪表开始控制加热器工作。
6、待干球温度测量值达到或接近干球温度设定值时，打开加湿开关，湿度控制仪表开始控制加湿器工作。
7、制冷机的开启：温湿度设置完成后，即可根据试验温度、湿度和环境温度、湿度决定是否开启制冷机。一般原则是试验温度高于环境温度10℃以上，且试验相对湿度高于环境湿度情况下可不开制冷机。如果试验温度低于环境温度，试验相对湿度低于环境湿度时均开制冷机。
8、试验温度在充分稳定后，如果培养箱温度显示值没有达到所需温度设定值，可稍稍调高温度设定值，反之则稍稍调低温度设定值。
9、根据实际需要，是否要观察试品，决定是否开启照明，在一般情况下不要开启照明灯。
10、培养箱内部自带限温装置，当试验温度达到约60℃时，自动切断加热电源，此时超温指示灯亮。
11、恒温恒湿培养箱使用完毕后，要填写好使用记录。
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